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Cytométrie et Imagerie en flux

La cytométrie en flux est une technique permettant d’analyser la taille, la granularité et l’intensité de fluorescence émise par des éléments (cellules, bactéries, billes,anticorps, sondes fonctionnelles …) en suspension alors qu’ils défilent un à un devant un ou plusieurs lasers.

L’intérêt de cette technique réside dans le fait qu’elle permet d’analyser rapidement un grand nombre d’éléments individuels.

Il est ainsi possible de mettre en évidence une hétérogénéité dans une population.

Cette technique peut être :

  • Semi-quantitative (comparaison d’intensité de marquage entre différentes populations et differentes conditions tests),
  • Quantitative (utilisation de standards pour avoir des valeurs absolues d’expression de marqueur ou de numération par exemple),
  • Préparatoire (un cytomètre-trieur permet de séparer un échantillon en sous-populations selon des critères de fluorescence choisis par l’expérimentateur).

Equipement

Analyseurs

  • SP6800, SONY
  • CYAN ADP XL9, Beckman Coulter
  • FACS Calibur, Becton Dickinson
  • FACS Canto II, Becton Dickinson
  • LSR Fortessa, Becton Dickinson
  • LSR Fortessa X20, Becton Dickinson
  • ImageStream X mkII, Amnis

Trieurs

  • FACS Aria III, Becton Dickinson
  • FACS Aria SORP, Becton Dickinson

Méthodes

Immunomarquage, marquage fonctionnel, sondes fluorescentes

Applications

  • Phénotypage
  • Etude de la mort et de la prolifération cellulaire
  • Activités fonctionnelles
  • Taux de transfection
  • Etudes et tri d’évènements rares et cellules souches
  • Tri à haut débit (selon les trieurs jusqu’à 4 voies, en tubes ou en plaques jusque 384 puits)

Organisation

Le personnel du plateau

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